Screening auf antiresorptive Arzneimittel1,2,3

  • High-Throughput-Screening der resorptiven Osteoklastenaktivität
  • Mehrfachtests einzelner Osteoklastenkulturen im Zeitablauf
  • Objektive Bewertung der in-vitro-Knochenresorption
  • Hohe Korrelation zum „Pit“-Bereich (charakteristische Vertiefungen, die aktive Osteoklasten durch Resorption hinterlassen).

Der Test ist ein enzymgebundener Immunabsorptionstest (ELISA) für die quantitative Bestimmung von Abbauprodukten von C-terminalen Telopeptiden von Typ-I-Collagen in Knochenzellkulturüberständen.

Collagen-Typ-I macht über 90 % der organischen Knochenmatrix aus. Während der Erneuerung des Skeletts wird Knochenmatrix abgebaut und anschließend werden Fragmente von Typ-I-Collagen in den Blutkreislauf abgegeben.

Der Resorptionsprozess kann in vitro untersucht werden, indem Knochenzellen auf devitalisierten Knochenscheiben oder Dentin kultiviert werden.

Der CrossLaps® for Culture (CTX-I) ELISA basiert auf der Beobachtung, dass bestimmte C-Telopeptidabbauprodukte von Typ-I-Collagen, die bei der osteoklastischen Knochenresorption freigesetzt werden, als modifizierte Dipeptide im Blut vorkommen. Diese modifizierten (β-isomerisierten) und quervernetzten Dipeptide (Glu-Lys-Ala-His-Asp-β-Gly-Gly-Arg) müssen für das Signal im CrossLaps® for Culture ELISA durch den Lysinrest kovalent quervernetzt sein.

Dieses Epitop ist im Typ-I-Collagen vieler Spezies vertreten (einschließlich Mensch, Rind, Elefant und Huhn). Es ist allerdings nicht bei der Ratte und der Maus anzutreffen.

1. Zhuo Y et al., Inhibition of bone resorption by the cathepsin K inhibitor odanacatib is fully reversible. Bone. 2014 Jul 16;67C:269-280.

2. Leung P et al., The effects of the cathepsin K inhibitor odanacatib on osteoclastic bone resorption and vesicular trafficking. Bone. 2011 Oct;49(4):623-35.

3. Schaller  S et al., In vitro, ex vivo, and in vivo methodological approaches for studying therapeutic targets of osteoporosis and degenerative joint diseases: how biomarkers can assist? Assay Drug Dev Technol. 2005 Oct;3(5):553-80.